技術文章
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技術文章
2023-427
近幾十年以來,隨著生命科技的快速發(fā)展,通過從動物組織中提取細胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術。細胞的規(guī)?;瘮U培成為新的細胞培養(yǎng)需求,目前細胞擴增手段主要有:轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細胞工廠和生物反應器擴培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn):轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡單、技術成熟、擴增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點,但是占地空間大、勞動強度大、產(chǎn)率低、細胞生長密度低、瓶間差異較難控制等,難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?;a(chǎn)。生物反應器培養(yǎng)雖然可以大大提高細胞產(chǎn)率但是剪切力會降低細胞的活率...
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2023-427
體外定點突變技術是當前生物學各領域研究中的一種重要實驗手段,是改造、優(yōu)化基因的便捷方案,是探索啟動子調(diào)節(jié)位點的有效手段,也是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復雜關系的有力工具。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能,二者之間的關系是蛋白質(zhì)組研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入,可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),對突變基因的表達產(chǎn)物進行研究有助于人類了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關系,探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂(DSB),基因組通常通...
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2023-427
對于制藥企業(yè)而言,當某一產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后,總會有一些微生物和少許原輔料殘留于設備中,在溫度和濕度達到一定程度時,微生物能夠與原輔料中殘留有機物出現(xiàn)無法物化反應,通過大量繁殖能夠形成不同類型代謝物,這些代謝物會從一定程度上影響藥物藥效甚至會產(chǎn)生毒副作用,從而使制藥企業(yè)每當生產(chǎn)一段時間或者更換產(chǎn)品后會存在產(chǎn)品質(zhì)量問題,因此無論維修設備或設備空閑一段時間,需要實現(xiàn)設備清潔工作。對于制藥企業(yè)來說,清潔主要針對設備中殘留的微生物或者各種代謝物,其總量在不影響藥品規(guī)定的質(zhì)量、藥效及安全性。...
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2023-426
CRISPR/Cas9基因編輯技術需要通過下一代測序(NGS)來驗證,能夠在核苷酸水平分辨率下進行大規(guī)模評估基因編輯的準確性和可靠性。高效、可自動化和可擴展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定,可以對CRISPR介導的切割進行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復序列。這些重復的DNA片段最初來源于病毒病原體,并作為模板將CRISPR相關蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導至新入侵的病毒。當Cas9遇到同源病毒序列時,它會...
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2023-425
HE染色實驗常見問題及解決方案HE染色是石蠟切片技術中常用的染色方法之一,簡稱為蘇木精-伊紅染色法。該方法使用堿性的蘇木精染液將細胞核內(nèi)的染色質(zhì)和胞質(zhì)內(nèi)的核酸染成紫藍色,同時使用酸性染料伊紅將細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分染成紅色。1、切片出現(xiàn)白色斑點原因:(1)烘片溫度過低,導致玻片未干透;(2)切片在二甲苯中停留時間過短;(3)二甲苯使用時間過長,導致脫蠟不效果不好。對策:若玻片未干透,先用無水乙醇去除水分,再重新脫蠟。若斑點是由于停留時間過短或使用時間過長造成的,則需重新操...
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