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細(xì)胞培養(yǎng)干貨-干細(xì)胞培養(yǎng)基和培養(yǎng)基添加劑

30多年來，生物產(chǎn)業(yè)一直在為許多細(xì)胞類型開發(fā)專門的細(xì)胞培養(yǎng)基，包括原代細(xì)胞和干細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)中常見和復(fù)雜的技術(shù)之一，培養(yǎng)基本身是維持培養(yǎng)中健康、增殖的干細(xì)胞的關(guān)鍵因素。所有干細(xì)胞培養(yǎng)基的基本成分主要包含：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、緩沖系統(tǒng)、谷氨酰胺、血清（或血清替代品）、特定生長因子以及其他補(bǔ)充劑等。一、基礎(chǔ)培養(yǎng)基經(jīng)典基礎(chǔ)培養(yǎng)基（DMEM、MEM、RPMI等）是化學(xué)成分明確的配方，每種配方都是為支持特定的細(xì)胞系或培養(yǎng)條件而開發(fā)的。許多基礎(chǔ)培養(yǎng)基起初是使用小鼠成纖維細(xì)胞、HeLa或...

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hTERT 永生化腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)方法

血管平滑肌脂肪瘤是腎臟的良性腫瘤，起源于假定的血管周圍上皮樣細(xì)胞。這些細(xì)胞可能會分化成具有黑素細(xì)胞、平滑肌或脂肪細(xì)胞特征的細(xì)胞。然而，血管平滑肌脂肪瘤的研究因缺乏成熟的血管平滑肌脂肪瘤衍生細(xì)胞系和良好的動物模型而受到限制。hTERT永生化腎上皮細(xì)胞來源于血管平滑肌脂肪瘤，因此研究人員現(xiàn)在可以在體外利用這些細(xì)胞的原代細(xì)胞特性和延長的壽命。UMB1949細(xì)胞系表達(dá)NG2和L1，并且在塊蛋白(Tsc2)的外顯子33中有一個確定的5bp缺失，在塊蛋白（和/或錯構(gòu)蛋白）中有突變。因此，...

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為什么要進(jìn)行進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定

據(jù)統(tǒng)計約30%細(xì)胞系被交叉污染或錯誤辨識，只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細(xì)胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞治療災(zāi)難性后果……，這將浪費大量時間、精力和金錢。世人皆知，細(xì)胞身嬌體貴難養(yǎng)活，養(yǎng)好細(xì)胞實屬不易。而這其中煩的是污染、怕的是掉包。因為盡管研究僧們有方法把一切污染的源頭扼殺在搖籃之內(nèi)，卻沒有火眼金睛辨別已經(jīng)換了馬甲的錯誤細(xì)胞。因而細(xì)胞一旦被李代桃僵，再資深的科研者都會陰溝里翻船，所以細(xì)胞鑒定顯得尤為重要。為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定？進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定是很重要的。...

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使用ipsc誘導(dǎo)多能干細(xì)胞生成類器官技術(shù)簡介

類器官是復(fù)雜的3-D器官樣微組織，由多種分化的細(xì)胞類型組成，其結(jié)構(gòu)組織類似于體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞，具有中央腔和其他類似體內(nèi)的結(jié)構(gòu)特征。從ipsc誘導(dǎo)多能干細(xì)胞產(chǎn)生的類器官已被描述用于胃、腸、肺、大腦、腎、肝臟等各種組織，這些類器官是其他體外模型的有吸引力的替代品；這些微組織比2-D細(xì)胞培養(yǎng)或簡單的3-D球體聚集體更好地概括了體內(nèi)組織表型，但沒有與器官外植體或組織切片相關(guān)的挑戰(zhàn)，例如培養(yǎng)壽命有限。事實上，類器官保留了許多細(xì)胞培養(yǎng)的典型有利特征，例如維持穩(wěn)定培養(yǎng)數(shù)月的能力，以及冷凍保存...

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單層細(xì)胞系傳代培養(yǎng)指南

大多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)物生長為單一厚度的細(xì)胞層（單層）或附著在玻璃或經(jīng)過特殊處理的塑料基質(zhì)上的薄片。為了保持培養(yǎng)物的健康和積極生長，通常需要定期對它們進(jìn)行傳代培養(yǎng)。常見的傳代培養(yǎng)方法涉及通過使用蛋白水解酶（如胰蛋白酶或膠原酶）破壞細(xì)胞間和細(xì)胞與基質(zhì)的連接。在細(xì)胞解離成主要由單細(xì)胞組成的懸浮液后，將它們稀釋并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)容器中。在那里它們可以重新附著并開始生長和分裂，經(jīng)過一段時間的孵化后再次接近匯合。此時，它們可以再次進(jìn)行傳代培養(yǎng)或用于實驗。以下指南描述了典型單層細(xì)胞培養(yǎng)...

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